A hidrogén-peroxid (különösen az elpárologtatott hidrogén-peroxid VHP) biológiai biztonsági szekrényekben történő fertőtlenítésre és sterilizálásra történő felhasználása után a szigorú és tudományos ellenőrzés és az eredmények ellenőrzése az egyetlen módja annak, hogy megerősítsük a sterilizálás hatékonyságát, valamint a minőség-ellenőrzés és a szabályozási megfelelőség alapvető követelményeit. Ez nem egyszerűen „futtassa az eszközt” folyamat, hanem egy zárt{1}}hurkú folyamat, amelyhez több fizikai, kémiai és biológiai bizonyítékra van szükség.
Az alábbiakban a monitoring és validációs technikák szisztematikus elemzését mutatjuk be.
Alapelv: Háromszoros ellenőrzési rendszer
A teljes validálásnak tartalmaznia kell a „folyamatparaméterek monitorozását”, a „kémiai indikátorokat” és a „biológiai indikátorok kihívásainak tesztelését”, amelyek mindegyike kiegészíti egymást és nélkülözhetetlen.
Folyamatparaméter-figyelés (valós idejű -figyelés annak biztosítására, hogy a feltételek megfeleljenek a szabványoknak)
Ez az ellenőrzés első védelmi vonala, amely magában foglalja a legfontosabb fizikai és kémiai paraméterek valós idejű rögzítését-az eszköz érzékelőin keresztül, bizonyítva, hogy a sterilizálási ciklus a beállított és hatékony paramétertartományon belül működik.
Monitoring paraméterek:
A hidrogén-peroxid gőzkoncentrációja (ppm): a legkritikusabb paraméter. Ezt az előre meghatározott célkoncentráción (pl. több száz ppm) kell elérni és megfelelő ideig tartani. Az alacsony koncentráció a sterilizálás meghibásodásához vezethet.
Relatív páratartalom (% RH): alacsony szinten szabályozva (általában<40%) to ensure that VHP is in an efficient "micro condensation" state rather than large droplet condensation. Excessive humidity can dilute disinfectants and may damage equipment.
Hőmérséklet: Figyelje a kamra hőmérsékletét, amely befolyásolja a telített gőznyomást és a kondenzációs folyamatot.
Nyomás/levegőáramlás: Győződjön meg arról, hogy a kamra tömített, és a gázkeringés normális.
Expozíciós idő: A célkoncentráción tartott időtartam.
Hogyan kell végrehajtani:
Automatikusan kiegészíti a VHP generátorba épített érzékelők és vezérlőrendszer.
Főbb követelmény: A berendezésnek képesnek kell lennie teljes ciklikus adatgrafikonok létrehozására és tárolására (koncentrációs idő görbe, hőmérsékleti és páratartalom görbe), amelyeket a hitelesítési jelentés részeként kell tartalmaznia. Bármilyen paramétereltérés az előre beállított tartománytól riasztást vagy huroklezárást kell, hogy eredményezzen.
Kémiai mutatók (minőségi/félkvantitatív, valós idejű vizuális eredmények{0}})
Arra használják, hogy gyorsan és intuitív módon meghatározzák, hogy egy cikk ki van-e téve hidrogén-peroxid sterilizálási környezetnek, és közvetve tükrözheti, hogy az adag elegendő-e.
Típus és elv:
Címke típusú kémiai indikátorkártya: Hidrogén-peroxidra érzékeny színezékeket tartalmaz. Elegendő mennyiségű hidrogén-peroxid adag (koncentráció x idő) felhalmozódása esetén egyik színről a másikra visszafordíthatatlan változások következnek be.
Elhelyezés helye: A legnehezebben elérhető sterilizálási helyre kell elhelyezni, például:
A széf szekrény munkaterületének legmélyebb sarka.
A vízelvezető csatorna belsejében.
A szűrő és a beépítőkeret közötti csatlakozás (ha lehetséges).
Belső kipufogócső (ha fertőtlenítés fedi).
Funkció és korlátozások:
Funkció: Azonnali eredményeket biztosít a gyors kioldáshoz; Győződjön meg arról, hogy a gőzt a kijelölt helyre osztotta ki; Azonosítóként a „feldolgozott” és a „feldolgozatlan” tételek megkülönböztetésére.
Korlátozások: Csak az expozíciót tudja igazolni, a sterilitást nem. A színváltozás csak azt jelzi, hogy elérték a minimális dózisküszöböt, de nem garantálja az összes mikroorganizmus elpusztulását.
Biológiai indikátor kihívásteszt (mennyiségi, végső hatékonyság igazolás)
Ez az ellenőrzés és a döntő bizonyíték arany standardja. Az ismerten magas rezisztenciájú, szabványosított mikrobiális spórák használatával közvetlenül bebizonyosodott, hogy a sterilizálási eljárás elegendő a legnehezebben elpusztítható mikroorganizmusok elpusztításához.
Biológiai mutatók kiválasztása:
Standard törzs: Geobacillus stearothermophilus spórái. Ez a nemzetközileg elismert standard tesztbaktérium, amely a legerősebb hidrogén-peroxiddal szemben ellenálló.
Hordozóforma: általában spóraszuszpenzió cseppfoltos papírcsík, rozsdamentes acéllemez, vagy meghatározott hordozóra szerelve.
Ismert spóraszám: Minden biológiai indikátor ismert számú spórát tartalmaz, jellemzően 10^5-10^6 CFU-t (telepképző egységet).
Elhelyezési stratégia (a legkritikusabb lépés):
Elhelyezés: A "leghidegebb pontra" kell elhelyezni, ahol a sterilizálás a legnagyobb kihívást jelent, vagy ahol a gáz a legnehezebb behatolni. A biológiai biztonsági szekrények ajánlott helyei a következők:
A munkapad alatt, a sarokban az elülső rács közelében.
A hátsó fal és a munkapad csatlakozása.
A belső eszközök, például pipettatartók hátoldalán vagy réseiben.
Ha az ellenőrzés hatálya kiterjed a kipufogószelep vagy a csővezeték belsejére.
Mennyiség: Használjon legalább 3 biológiai indikátort, és tartalmazzon egy kezeletlen pozitív kontrollt.
Tesztelési és értelmezési folyamat:
Expozíció: Végezzen el egy teljes VHP-sterilizálási ciklust a BI-szekrény segítségével.
Újrahasznosítás és termesztés:
A ciklus befejezése után steril körülmények között távolítsa el a BI-t.
Helyezze egy tenyésztőközeget tartalmazó, erre a célra szolgáló helyreállító csőbe.
56-60 C-os inkubátorban tenyésztjük 24-48 órán keresztül (meghatározott idő az utasítások szerint).
Egyidejűleg tenyésztjük a pozitív kontrollt (nem sterilizált) és a negatív kontrollt (steril táptalaj).
Az eredmény értelmezése:
Sikeres ellenőrzés: Minden sterilizált BI táptalaj tiszta marad (nincs elszíneződés/zavarosodás), ami azt jelzi, hogy a spórák nem élnek túl. A pozitív kontrollnak aktív növekedést kell mutatnia (a táptalaj sárgulása/zavarossága), és a negatív kontrollnak tisztának kell maradnia.
Ellenőrzési hiba: Bármely feldolgozott BI növekedést (sárgulást/zavarosságot) mutat, a sterilizálási ciklus hibáját jelzi. Szükséges az okok alapos kivizsgálása (például paraméterhibák, elhelyezés, berendezés meghibásodása, tömítési problémák stb.), a tervet módosítani, és ismételten teljes körű ellenőrzést kell végezni.
Ellenőrzési ciklus és típus
Első ellenőrzés:
A VHP berendezés beszerelése vagy egy új típusú biztonsági szekrény kezdeti sterilizálása után el kell végezni.
Ez a legátfogóbb ellenőrzés, amely megköveteli a „leghidegebb pont” meghatározását és a hatékony hurokparaméterek megállapítását.
Rendszeres újraérvényesítés:
Általában félévente vagy évente hajtják végre.
A berendezések, programok és kezelők konzisztenciájának ellenőrzésére szolgál.
Napi monitorozás:
Minden sterilizálási ciklushoz kémiai indikátorokat kell használni, és át kell tekinteni a folyamatparaméter-térképeket.
A biológiai indikátorvizsgálatok gyakorisága szükség szerint csökkenthető (például havonta vagy negyedévente), de a szigorú előírásokkal rendelkező területeken minden tétel/ciklus használatára szükség lehet.
Dokumentum feljegyzések és jelentések (megfelelőségi bizonyíték)
Minden felügyeleti és ellenőrzési tevékenységet hivatalosan dokumentálni kell, és a jelentésnek tartalmaznia kell legalább:
Berendezés információ: VHP generátor típusa és száma.
A céleszköz információi: Biosafety szekrény modellje, száma, helye.
Hurokparaméterek: beállított célkoncentráció, idő, hőmérséklet és páratartalom stb.
Folyamatadatok grafikonja: a tényleges működés koncentrációs idő görbéje stb.
Kémiai indikátorok: típus, tételszám, elhelyezés helye, színváltozás eredményei (fényképekkel csatolva).
Biológiai indikátorok: törzs, tételszám, spóramennyiség, elhelyezés helye, tenyésztési eredmények (mellékelve a tenyészcső fotóival).
Következtetés: Világosan határozza meg, hogy a sterilizálási ciklus hatékony-e.
Végrehajtó és dátum: Az üzemeltető és a felülvizsgáló aláírása.
összefoglaló
A sterilizálatlan sterilizálás egyenértékű a nem sterilizálással.
A biológiai biztonsági szekrények hidrogén-peroxidos fertőtlenítésére és sterilizálására szolgáló megbízható validációs rendszer:
Biztosítsa a folyamatvezérlést a „folyamatparaméter-leképezéssel”, gyors vizuális kibocsátást érjen el a „kémiai indikátorok” segítségével, és végül szerezze meg a mikrobiológiai végső hatékonysági tanúsítványt a „biológiai indikátorok tesztelésével”.
Ez a hármas validációs rendszer a kulcsa annak, hogy a hidrogén-peroxidos fertőtlenítést „műveletből” nyomon követhető, reprodukálható és megbízható „tudományossá” emeljük, és egyben a GLP, a GMP és a biobiztonsági laboratóriumi akkreditáció követelményeinek való megfelelés sarokköve itthon és külföldön egyaránt. A laboratóriumvezetőknek ezt kötelező eljárásként kell megvalósítaniuk és folyamatosan figyelemmel kell kísérniük.
